嘉靖十六年(1537年)，李时珍20岁，他第二次赴武昌乡试，仍然没有考中。在这一年里，李时珍与吴氏女结为伉俪。吴氏夫人既勤劳又贤惠，善解人意而体贴入微，在李时珍以后行医、采药、种药、编书的过程中，处处都渗透着吴氏夫人的辛劳。嘉靖十九年(1540年)，李时珍第三次去武昌乡试，结果又是名落孙山。李时珍的三次乡试为什么均遭失败呢，这除了他思想比较活跃，不适应那些形式呆板、内容空洞，枯操乏味，严重束缚人们思想的八股格式答卷外，另一个原因就是考试中存在着种种弊端。表面看起来考场纪律十分严明，但有钱有势家的子弟却在背后营私作弊，诸如行贿、代考、换卷、顶替等，弊端百出.明正德三年(1508年)，大学士王鏊和吏部尚书梁储主持会试，大是大太监刘瑾一个人就批了个五十人的条子，主考人只得俯首听命，全部录取.第三次落榜之后，李时珍便与仕途决绝，全身心地投入他那艰苦而又漫长的医药科学实践和研究之中，直至成为一代大家。